28 gennaio 2021

La Roulette russa del vaccino Covid ► Tutto sugli adiuvanti

I vaccini contro i coronavirus dovrebbero essere 'intelligenti', perché usano nuovi adiuvanti che possono colpire il sistema immunitario in modi specifici. D'altra parte, molti di loro potrebbero causare reazioni immediate di 'ipersensibilità' come anafilassi o convulsioni, o quella che sembra una reazione ritardata, cioè quella che sfocia in un disturbo autoimmune. Un adiuvante (dire 'add-joov-unt') è una sostanza che viene deliberatamente aggiunta a un vaccino per far avere un certo tipo di risposta immunitaria.
Se un vaccino contiene solo un antigene (per esempio un virus), non fa produrre abbastanza anticorpi, quindi vengono aggiunti adiuvanti per forzare una reazione e farla durare più a lungo:
Gli adiuvanti possono essere molecole, composti o complessi macromolecolari che aumentano la potenza, la qualità o la longevità delle risposte immunitarie specifiche agli antigeni, ma che dovrebbero causare una tossicità minima.
Nota, nella citazione sopra, possono solo dire "dovrebbero", perché i coadiuvanti sono cattivi per il corpo - questo è il loro scopo. Dovrebbero farvi reagire, ma solo un po'! Quindi se state pensando, "Bene, allora cosa sono queste cose, e cosa mi faranno?", la risposta è, "Dipende! Questo in parte perché abbiamo tutti un diverso corredo genetico, e diversi tipi di microbi che vivono dentro di noi. Ma dipende anche da quale vaccino stiamo parlando, perché ogni azienda fa la sua miscela speciale, quindi sono tutti un po' diversi. 
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25915555/

Tuttavia ci si può informare su come funzionano i vaccini genetici, e come la reazione ad un vaccino è legata a disturbi autoimmuni e ai piccoli batteri che vivono dentro il nostro corpo! Questo significa sapere un po', ad esempio, come funziona il corpo, e cosa fanno i microbi come i batteri e i virus nel corpo, e forse anche cos'è il DNA. Tutto questo vale la pena di saperlo, specialmente se ti viene richiesto di continuare a fare delle vaccinazioni extra per i 'passaporti sanitari' che sono previsti oramai in tutto il mondo.

Una panoramica dei coadiuvanti Ronavax

Ci sono diversi nuovi adiuvanti utilizzati nei vaccini contro il coronavirus (o 'ronavax'), a volte in diverse combinazioni, ed è tutto un po' sconcertante, soprattutto con tutti i nomi strani e le cose che non hai mai sentito. Quindi, invece di cercare di imparare i nomi dei singoli coadiuvanti, è più facile e più utile pensare a loro in termini di come operano. Per spezzare un po' il tutto, li raggrupperemo in queste categorie di base:
  • Nanoparticelle
  • MRNA e DNA
  • Inserti genetici
  • Elettroporazione
  • Alluminio
  • Batteri finti (Lipid A e CPG ODNs)
  • Modifiche chimiche xenobiotiche
  • Lipidi
I vecchi adiuvanti, come il mercurio e il thimerosal, sono stati in gran parte abbandonati, perché i nuovi sono destinati ad essere più intelligenti, e più desiderati per l'uso nei vaccini genetici. Alcuni dei nuovi adiuvanti sono stati testati e alcuni sono già autorizzati in altri vaccini, ma nel complesso, sono ancora sperimentali, soprattutto perché lavorano in combinazione con le altre parti del vaccino, eppure pochi test sembrano essere richiesti o condotti per il ronavax. Il vaccino della Pfizer, per esempio, contiene mRNA, che di per sé è un adiuvante, ma finora lo hanno testato solo su alcuni ratti, perché l'Organizzazione Mondiale della Sanità non richiede ulteriori studi. Questo è in linea con i vaccini proteici geneticamente modificati, per i quali non sono richiesti test di genotossicità.

Non solo i nuovi adiuvanti sono molto potenti, ma sono stati anche ampiamente omessi dalla conversazione pubblica sui vaccini contro il coronavirus. Sono ora in grado di colpire parti specifiche del sistema immunitario, quindi, come i vaccini genetici a cui sono aggiunti, gli adiuvanti sono considerati intelligenti.

I moderni vaccini genetici e gli adiuvanti che contengono stanno cercando di controllare ogni aspetto della risposta del corpo. (Per esempio, gli adiuvanti nei vaccini contro il coronavirus cercano di provocare una "risposta Th1" piuttosto che una "risposta Th2"). Anche il codice genetico per l'mRNA può essere modificato "al fine di sintonizzare o adattare le risposte fisiologiche e i risultati". Ma il corpo non è così semplice, la reazione non è sotto controllo, e alterare la risposta immunitaria potrebbe avere effetti a catena.

Il corpo umano è sorprendentemente complesso e adattivo, ognuno con il proprio corredo genetico, quindi tutti possiamo avere una reazione diversa, perché sono i geni che codificano "recettori immunitari, fattori di trascrizione e molecole di segnalazione coinvolti nelle risposte immunitarie". Ma diventa ancora più complicato, perché ci sono trilioni di microbi che vivono dentro di noi, e hanno dieci volte più geni di noi e tutti possono interagire con il contenuto di un vaccino.


Quelli con i contratti

In termini di quale vaccino ha quali adiuvanti, ecco una lista di quelli che hanno i grandi contratti (ma attenzione, in questo momento sembrerà solo una lista di parole! Ci vuole un po' per imparare le nuove parole, quindi non aspettatevi di capire tutto subito!)

  • Nanoparticelle lipidiche con mRNA (Pfizer/BioNTech, Moderna, Curevac)
  • DNA virale (Johnson & Johnson, e AstraZeneca/Oxford University)
  • Plasmide batterico, usando l'elettroporazione (Inovio)
  • Vaccini proteici contenenti nuove miscele di nanoparticelle lipidiche, ad esempio squalene e colesterolo (ad esempio Matrix-M di Novavax e AS03 di GSK)
  • Vaccino proteico contenente un CPG-ODN (Valenva sta aggiungendo un adiuvante chiamato CPG-1018 al suo Ronavax)
I primi tre vaccini nella lista di cui sopra contengono un codice genetico che ti fa produrre le proteine nel tuo corpo, mentre gli ultimi due contengono proteine geneticamente modificate (parti di un virus) che sono state prodotte in un bioreattore, per esempio in cellule di insetti. Anche se si dice che i vaccini proteici richiedono forti adiuvanti, i vaccini DNA/mRNA potrebbero non aver bisogno di aggiungere nulla, perché il metodo usato da ciascuno è di per sé un adiuvante (il materiale genetico estraneo è un adiuvante, e così le nanoparticelle). In realtà è possibile inserire alcuni adiuvanti genetici, però, quindi c'è la possibilità che i vaccini a DNA/mRNA abbiano qualcosa in più.

Un brevetto dell'Università di Oxford, per un vaccino contro la MERS che utilizza lo stesso vettore virale ChAdOx del ronavax di AstraZeneca, dice che non viene aggiunto alcun adiuvante. Poi di nuovo, ci sono altri ingredienti nel vaccino che potrebbero contribuire agli effetti avversi sul corpo, cioè eccipienti e contaminanti. La ricetta finale descritta nel brevetto include istidina, saccarosio, cloruro di sodio, cloruro di magnesio, Polisorbato 80, EDTA, etanolo e acido cloridrico. Ma potrebbe anche contenere pezzi di bambino, perché è cresciuta in cellule di un feto abortito (lo stesso per la J&J vax).


C'è una vasta gamma di disturbi che potrebbero derivare da un vaccino covid, la maggior parte dei quali sono classificati come reazioni allergiche, ipersensibili o autoimmuni. Molti di questi disturbi sono stati riassunti in una riunione della FDA sulle possibili reazioni avverse al ronavax. Includono tutti i classici: anafilassi, artrite, vari tipi di mielite, ictus, convulsioni, problemi cardiaci, problemi di gravidanza e nascita, cose che vanno male con il sangue, sindrome di Guillain-Barré, e, sì, anche la morte. Il CDC sta consigliando agli amministratori del Ronavax di assicurarsi di avere almeno l'epinefrina iniettabile e gli antistaminici H1 disponibili, nel caso qualcuno soffra di shock anafilattico.

L'anafilassi è una reazione immediata e ovvia a un vaccino, ma gli altri disturbi richiederebbero un po' di tempo per svilupparsi, e potrebbero alla fine portare a una diagnosi di malattia autoimmune, ma, ehi, non preoccupatevi! C'è ora una vasta gamma di farmaci commercializzati alle persone con queste condizioni, la maggior parte dei quali mirano a sopprimere l'attività del sistema immunitario. A quanto pare, "gli immunosoppressivi biologici usati per trattare le malattie autoimmuni sono i farmaci più venduti in tutto il mondo", quindi qualsiasi danno collaterale dei vaccini sarà un bel guadagno.

Comprendere la risposta immunitaria

Il sistema immunitario è una rete molto complessa che si adatta costantemente a ciò che accade. I produttori di vaccini hanno capito quali cellule hanno risposte specifiche a varie sostanze, per lo più basate su come noi rispondiamo ai segnali di pericolo. Alcune cellule danno segnali, altre attivano altre cellule e altre ancora attaccano l'invasore, per esempio.
Gli adiuvanti operano coinvolgendo le cellule immunitarie innate, come le cellule dendritiche (DC), e modellano la successiva immunità adattativa. I modelli molecolari associati agli agenti patogeni (PAMP) e i segnali di pericolo sono potenti adiuvanti; essi attivano le DC stimolando i recettori di riconoscimento degli agenti patogeni sulla superficie delle cellule o intracellulari...
Gli adiuvanti tentano di imitare la risposta naturale agli agenti patogeni e ad altri segnali di pericolo, ma qualsiasi intervento può imitare solo una piccola parte dell'intera reazione. Non tutti reagiamo allo stesso modo, e le nostre risposte dipendono da ciò di cui il nostro corpo ha bisogno nel complesso, e da quale sia la minaccia.

NANOPARTICELLE


I coadiuvanti con piccoli pezzi all'interno (cioè i coadiuvanti particolati) sono solitamente chiamati nanoparticelle (e se sono un po' più grandi, sono chiamate microparticelle). Qualsiasi oggetto estraneo che entra nel corpo fa scattare segnali d'allarme che iniziano una reazione immunitaria, ma le moderne nanoparticelle sono progettate per innescare risposte specifiche come risultato di ciò di cui sono fatte. Questo è possibile perché possono entrare nelle cellule per rilasciare il loro carico utile. Le nanoparticelle possono essere formate da lipidi, polisaccaridi, particelle simili a virus e/o allume; per esempio, i complessi immunostimolanti (ISCOM) sono nanoparticelle sferiche simili a gabbie formate tramite l'autoassemblaggio di una miscela di Quil A (che è una saponina), colesterolo, fosfolipidi e antigeni.

Novavax produce un adiuvante chiamato Matrix-M e prevede di usarlo nel suo vaccino contro il coronavirus. Contiene nanoparticelle da 40 nm, fatte con saponine, colesterolo e fosfolipidi, quindi è simile all'adiuvante GSK, AS03.
Novavax ha dimostrato quanto sia potente il suo adiuvante quando ha testato un vaccino contenente "nanoparticelle spike full-length" di MERS-CoV e SARS-CoV. Hanno pubblicato un documento di ricerca nel 2014 ('Purified coronavirus spike protein nanoparticles induce coronavirus neutralizing antibodies in mice') descrivendo questo esperimento. Il vaccino Novavax MERS è stato usato per vaccinare i topi, per testare diverse combinazioni di adiuvanti. Alcuni topi hanno ricevuto l'allume nel vaccino, altri l'adiuvante di Novavax chiamato Matrix M, mentre un terzo gruppo ha ricevuto solo l'antigene. I risultati illustrano chiaramente gli effetti intensivi sia dell'allume che delle nanoparticelle lipidiche; quando hanno dato ai topi 1 μg di nient'altro che la proteina MERS, hanno prodotto GMT (titoli medi geometrici) di 49 in termini di anticorpi neutralizzanti; quando è stato aggiunto l'allume, il GMT era 735; ma con Matrix-M il GMT era 3.378! Questo significa che i livelli di anticorpi neutralizzanti erano 15 volte più alti con l'allume, e ben 68 volte più alti con Matrix M. Si suppone che gli adiuvanti "migliorino" la risposta immunitaria, che si potrebbe immaginare come una leggera spinta nella giusta direzione, mentre questi risultati dei test rivelano un adiuvante che è più come una granata a mano. Sembra che il successo di un vaccino possa dipendere più dall'adiuvante che dall'antigene.

Le nanoparticelle possono essere formate in emulsioni olio in acqua utilizzando una tecnica chiamata microfluidizzazione. La dimensione effettiva delle particelle influenza il modo in cui il contenuto del vaccino viene assorbito dalle cellule e come interagisce con l'antigene. "Le microparticelle di allume rimangono localizzate nel sito d'iniezione", mentre quelle di nano dimensioni fatte di lipidi si spostano rapidamente nel linfonodo drenante. Le nanoparticelle lipidiche (LNP) formano forme diverse a seconda di dove si trovano nel loro stato di transizione di fase (come cristalli liquidi), e la forma delle LNP può influenzare il loro effetto: per esempio, se sono a forma di asta o di ago, causano meno una risposta infiammatoria rispetto a quelle sferiche. Altri fattori che influenzano le LNP sono il tipo di lipidi utilizzati, l'uso di stabilizzatori sterici e la loro carica superficiale.

Si dice che le nanoparticelle attivino l'inflammasoma, il che rende il loro uso nei vaccini una vera preoccupazione, perché l'inflammasoma deve essere attentamente regolato, altrimenti può danneggiare il corpo. L'inflammasoma percepisce i segnali di pericolo dalle cellule in difficoltà, così come le minacce degli agenti patogeni (compresi quelli nel microbioma intestinale). Una volta attivato, crea una cascata di risposte infiammatorie, ma può andare troppo lontano e "causare risposte incontrollate dei tessuti che possono contribuire a varie malattie, tra cui disturbi autoinfiammatori, malattie cardiometaboliche, cancro e malattie neurodegenerative".

Diversi vaccini contenenti nanoparticelle sono stati autorizzati nell'ultimo decennio, per esempio il vaccino Pandemrix che ha portato un certo numero di giovani ad avere la narcolessia. Questi vaccini usano lipidi per fare le nanoparticelle, che sono fondamentalmente tipi di olio. Questo potrebbe essere un'ulteriore preoccupazione, dato che molti disturbi autoimmuni sono anche legati all'alterazione del metabolismo dei lipidi nel corpo. Tutte le nostre cellule hanno membrane fatte di lipidi, e le nanoparticelle potrebbero influenzare il delicato equilibrio dei lipidi in questa membrana quando si fondono con essa.


Si dice che il sistema del complemento sia attivato dai lipidi PEG nei liposomi, il che potrebbe essere un problema perché il complemento è una parte del sistema immunitario che si occupa delle infezioni e delle risposte infiammatorie, ed è anche legato a disturbi autoimmuni come il lupus. Tuttavia, questo meccanismo non è stato adeguatamente studiato, nonostante il fatto che può "alterare drammaticamente la farmacocinetica delle particelle su somministrazione ripetuta, con conseguenze significative per il loro uso in applicazioni terapeutiche".

Le nanoparticelle lipidiche (LNP) sono utilizzate per consegnare l'mRNA in alcuni dei vaccini contro il coronavirus, e informazioni limitate su di esse sono state recentemente fornite dai produttori. Per esempio, il vaccino Pfizer usa LNPs composte da quattro lipidi, due dei quali (colesterolo e DSPC) sono descritti come "presenti in natura", e si dice che questi lipidi "saranno metabolizzati ed escreti" allo stesso modo di quelli che si trovano nel corpo umano. Lo stesso non è detto degli altri due lipidi (ALC-0315 e ALC-0159) che sono miscele proprietarie, ma si dice che gli LNP rimangono nel corpo per diversi giorni.

GLI EFFETTI ADIUVANTI DI MRNA E DNA

Se iniettati nel corpo, sia il DNA che l'mRNA sono attaccati come invasori stranieri prima che possano entrare in una cellula; sono degradati da cose chiamate ribonucleasi, o RNasi (enzimi che digeriscono l'mRNA). Questo ha reso difficile per i ricercatori utilizzare l'mRNA come terapia, così come altri problemi, come il tentativo di far passare l'mRNA attraverso la membrana cellulare (entrambi hanno una carica negativa, e "due elementi di una stessa carica si respingono a vicenda"). Anche se riuscivano a farlo entrare in una cellula, veniva degradato da enzimi intracellulari chiamati esonucleasi. Queste reazioni dimostrano la potenza e la flessibilità della risposta immunitaria - tutto ciò ha impedito lo sviluppo di trattamenti con l'mRNA, fino a quando i ricercatori non hanno escogitato varie soluzioni, che comportano l'alterazione della sequenza genetica e l'uso di modifiche chimiche non naturali (utilizzando versioni della cosa reale, ad esempio la pseudo-uridina) per ingannare il sistema immunitario in modo che non venga distrutto, ma sia ancora abbastanza comprensibile per il corpo da obbedire alle istruzioni contenute nel codice genetico. Mantiene quindi il suo effetto adiuvante - in un certo senso fa scattare un allarme se si lega a speciali recettori cellulari. Questi recettori possono riconoscere diversi tipi di RNA o DNA che sono normalmente associati ad agenti patogeni come virus e batteri, che poi innescano una reazione a catena in altre cellule immunitarie.


I vaccini prodotti da Inovio hanno due tipi di DNA, perché contengono il DNA del plasmide batterico che funge da vettore, così come il DNA che codifica l'antigene del coronavirus. Il DNA batterico è riconosciuto dal corpo a causa del suo pattern CpG; questo innesca il sistema immunitario, ad esempio la produzione di citochine TH1.

L'elettroporazione è una tecnica usata per ottenere plasmidi di DNA nelle cellule, e Inovio ha il proprio dispositivo, chiamato CELLECTRA, per questo scopo. Il DNA deve arrivare fino al nucleo, per essere trascritto in mRNA, cosa che è possibile fare con i vettori virali perché sono in grado di attraversare le membrane cellulari, ma i plasmidi di DNA hanno bisogno di più aiuto. L'elettroporazione consiste nell'applicare una serie di impulsi elettrici alla pelle, subito dopo essere stati vaccinati (nello stesso posto). Questo rende le membrane cellulari più permeabili creando temporaneamente dei piccoli fori in modo che il DNA possa entrare. Inoltre "aumenta la distribuzione del DNA in tutto il tessuto e provoca una reazione infiammatoria locale, entrambe le quali contribuiscono a una risposta immunitaria più forte". Questo perché il corpo percepisce il pericolo, sia dal danno cellulare, sia dalla morte cellulare.

Coadiuvanti genetici

Questi possono essere aggiunti ai vaccini che usano vettori virali, plasmidi batterici, o mRNA in nanoparticelle, poiché si tratta solo di buttare dentro alcuni extra geni, da qualche parte o altro. L'uso di molecole adiuvanti aggiuntive, come il GM-CSF, ha dimostrato di spostare una risposta di tipo Th2 in una risposta di tipo Th1. Anche se non ci sono segni di adiuvanti genetici utilizzati nei vaccini contro il coronavirus, vale la pena conoscerli perché, a volte sono chiamati adiuvanti molecolari o endogeni e sono basati su geni umani, in modo che vengano prodotte proteine specifiche in grado di colpire "tumori, autoimmunità, infezioni virali e trapianti". Possono includere proteine da shock termico, citochine (per esempio IL-12), chemochine, anticorpi, piccoli peptidi e proteine.

Il brevetto di Moderna per un vaccino contro il betacoronavirus descrive la possibilità di aggiungere un adiuvante di flagellina. La flagellina è un tipo di batterio che ha dei piccoli tentacoli chiamati "flagelli" che lo aiutano a muoversi. Quando viene aggiunta alle nanoparticelle, può essere più 'potente' della cosa reale. Curevac produce RNAdjuvant, che si dice eviti di indurre la splenomegalia (milza ingrossata) nei topi "come descritto per gli adiuvanti standard come il CpG-DNA". I vaccini RNActive® di Curevac hanno due componenti - uno è una forma naturale di mRNA, che codifica l'antigene, e l'altro è la protamina che aumenta la risposta immunitaria attivando il recettore TLR7. La protamina è una proteina nucleare che stabilizza il DNA durante la creazione dello sperma, che si dice aiuti a fermare la degradazione dell'mRNA da parte delle cellule nel sangue.

Per un elenco completo degli adiuvanti usati nel ronavax, vedere "Potential adjuvants for the development of a SARS-CoV-2 vaccine based on experimental results from similar coronaviruse" (Potenziali adiuvanti per lo sviluppo di un vaccino SARS-CoV-2 basato sui risultati sperimentali di coronavirus simili), di Guptaa e Guptab.

Allume
L'allume ... è stato usato come vettore/veicolo per una serie di adiuvanti della nuova era, tra cui IL-12, GM-CSF, CpG e MPL. Soprattutto, la recente approvazione di MPL-Alum® per due diversi vaccini, Fendrix e Cervarix, ha creato un precedente per l'uso di agonisti TLR4 nei vaccini umani.
L'alluminio può essere assorbito attraverso la pelle e può depositarsi nei tessuti, ad esempio può raccogliersi nel tessuto del seno con l'uso di antitraspiranti. È stato usato nei vaccini per anni perché fa sì che l'antigene rimanga in giro più a lungo, prolungando così la risposta immunitaria. L'allume uccide anche le tue cellule, e l'effetto di questo è detto essere "un adiuvante endogeno" (uno che tu stesso produci); fondamentalmente, quando le cellule muoiono, rilasciano DNA e acido urico, entrambi i quali sono percepiti come segnali di pericolo, portando ad ancora più reazioni immunitarie. I vaccini a base di allume innescano risposte anticorpali di tipo Th2 che sono associate a reazioni allergiche e disturbi autoimmuni.

Altre considerazioni

Accidenti, hai letto davvero tutto questo? E' davvero difficile, lo so, così ho scritto altri articoli che spiegano meglio queste cose, ma in modo più generale. Ce n'è uno su nient'altro che i lipidi, e un altro sull'uso della genetica 'aliena' nei vaccini del coronavirus. Anche questi sono un po' pesanti, quindi ho cercato di renderli più leggibili! Se vuoi saperne di più su come i disturbi autoimmuni sono legati al microbioma umano e alla sua interazione con i contenuti dei vaccini, controlla il mio articolo sul mimetismo molecolare. Infine, ma non meno importante, c'è un 'primer ronavax' che spiega un po' meglio alcune delle nuove parole e concetti.

Di Julie Beal

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